ការអនុវត្តតម្រងនៅក្នុង cytometry លំហូរ។

(Flow cytometry , FCM ) គឺជាឧបករណ៍វិភាគកោសិកាដែលវាស់អាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence នៃសញ្ញាសម្គាល់កោសិកាដែលមានស្នាមប្រឡាក់។ វា​ជា​បច្ចេកវិទ្យា​ខ្ពស់​ដែល​ត្រូវ​បាន​បង្កើត​ឡើង​ដោយ​ផ្អែក​លើ​ការ​វិភាគ​និង​ការ​តម្រៀប​កោសិកា​តែ​មួយ​។ វាអាចវាស់វែង និងចាត់ថ្នាក់យ៉ាងឆាប់រហ័សនូវទំហំ រចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុង DNA, RNA, ប្រូតេអ៊ីន, antigens និងលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវន្ត ឬគីមីផ្សេងទៀតនៃកោសិកា ហើយអាចផ្អែកលើការប្រមូលផ្តុំនៃចំណាត់ថ្នាក់ទាំងនេះ។

图片 ១

Flow cytometer ជាចម្បងមានប្រាំផ្នែកដូចខាងក្រោមៈ

1 អង្គជំនុំជម្រះលំហូរ និងប្រព័ន្ធរាវ

2 ប្រភពពន្លឺឡាស៊ែរ និងប្រព័ន្ធកែទម្រង់ធ្នឹម

3 ប្រព័ន្ធអុបទិក

4 ប្រព័ន្ធអេឡិចត្រូនិច ការផ្ទុក ការបង្ហាញ និងការវិភាគ

5 ប្រព័ន្ធតម្រៀបកោសិកា

图片 ២

ក្នុងចំណោមពួកគេ ការរំភើបចិត្តដោយឡាស៊ែរនៅក្នុងប្រភពពន្លឺឡាស៊ែរ និងប្រព័ន្ធបង្កើតធ្នឹម គឺជាការវាស់វែងសំខាន់នៃសញ្ញា fluorescence នៅក្នុងលំហូរ cytometry ។ អាំងតង់ស៊ីតេនៃពន្លឺរំជើបរំជួល និងពេលវេលានៃការប៉ះពាល់គឺទាក់ទងទៅនឹងអាំងតង់ស៊ីតេនៃសញ្ញា fluorescence ។ ឡាស៊ែរ​ជា​ប្រភព​ពន្លឺ​រួម​គ្នា​មួយ​ដែល​អាច​ផ្តល់​ពន្លឺ​មួយ​រលក​ពន្លឺ អាំងតង់ស៊ីតេ​ខ្ពស់ និង​មាន​លំនឹង​ខ្ពស់។ វាគឺជាប្រភពពន្លឺរំភើបដ៏ល្អ ដើម្បីបំពេញតាមតម្រូវការទាំងនេះ។

图片 ៣

មានកែវរាងស៊ីឡាំងពីររវាងប្រភពឡាស៊ែរ និងអង្គជំនុំជម្រះលំហូរ។ កញ្ចក់ទាំងនេះផ្តោតទៅលើធ្នឹមឡាស៊ែរដែលមានផ្នែកឆ្លងកាត់រាងជារង្វង់ដែលបញ្ចេញចេញពីប្រភពឡាស៊ែរទៅជាធ្នឹមរាងអេលីបដែលមានផ្នែកឆ្លងកាត់តូចជាង (22 μm × 66 μm) ។ ថាមពលឡាស៊ែរនៅក្នុងធ្នឹមរាងអេលីបនេះត្រូវបានចែកចាយទៅតាមការចែកចាយធម្មតា ដែលធានានូវអាំងតង់ស៊ីតេនៃការបំភ្លឺស្របគ្នាសម្រាប់កោសិកាដែលឆ្លងកាត់តំបន់រាវរកឡាស៊ែរ។ ម៉្យាងវិញទៀត ប្រព័ន្ធអុបទិកមានសំណុំជាច្រើននៃកញ្ចក់ ម្ជុល និងតម្រង ដែលអាចបែងចែកជាពីរក្រុម៖ ផ្នែកខាងលើ និងផ្នែកខាងក្រោមនៃអង្គជំនុំជម្រះលំហូរ។

图片 ៤

ប្រព័ន្ធអុបទិកនៅពីមុខអង្គជំនុំជម្រះលំហូរមានកញ្ចក់ និងរន្ធ។ មុខងារចម្បងនៃកញ្ចក់ និងរន្ធដោត (ជាធម្មតាកញ្ចក់ពីរ និងរន្ធម្ជុល) គឺផ្តោតទៅលើធ្នឹមឡាស៊ែរជាមួយនឹងផ្នែកឆ្លងកាត់រាងជារង្វង់ដែលបញ្ចេញដោយប្រភពឡាស៊ែរចូលទៅក្នុងធ្នឹមរាងអេលីបដែលមានផ្នែកឆ្លងកាត់តូចជាង។ វាចែកចាយថាមពលឡាស៊ែរយោងទៅតាមការចែកចាយធម្មតា ធានានូវអាំងតង់ស៊ីតេនៃការបំភ្លឺជាប់លាប់សម្រាប់កោសិកានៅទូទាំងតំបន់រកឃើញឡាស៊ែរ និងកាត់បន្ថយការជ្រៀតជ្រែកពីពន្លឺដែលវង្វេង។

 

មានតម្រងបីប្រភេទសំខាន់ៗ៖ 

1: តម្រងឆ្លងកាត់វែង (LPF) - អនុញ្ញាតឱ្យតែពន្លឺដែលមានចម្ងាយរលកខ្ពស់ជាងតម្លៃជាក់លាក់មួយដើម្បីឆ្លងកាត់។

2: Short-pass filter (SPF) - អនុញ្ញាត​ឱ្យ​តែ​ពន្លឺ​ដែល​មាន​ប្រវែង​រលក​ក្រោម​តម្លៃ​ជាក់លាក់​ប៉ុណ្ណោះ​ដើម្បី​ឆ្លងកាត់។

3: Bandpass filter (BPF) - អនុញ្ញាតឱ្យពន្លឺក្នុងជួររលកជាក់លាក់មួយឆ្លងកាត់ប៉ុណ្ណោះ។

បន្សំផ្សេងគ្នានៃតម្រងអាចដឹកនាំសញ្ញា fluorescence នៅចម្ងាយរលកផ្សេងគ្នាទៅបំពង់ photomultiplier បុគ្គល (PMTs) ។ ឧទាហរណ៍ តម្រង​សម្រាប់​រក​ឃើញ​ហ្វ្លុយអូរីសពណ៌បៃតង (FITC) នៅពីមុខ PMT គឺ LPF550 និង BPF525។ តម្រងដែលប្រើដើម្បីរកឃើញ fluorescence ពណ៌ទឹកក្រូច-ក្រហម (PE) នៅពីមុខ PMT គឺ LPF600 និង BPF575។ តម្រងសម្រាប់រកមើលហ្វ្លុយអូរីសក្រហម (CY5) នៅពីមុខ PMT គឺ LPF650 និង BPF675។

图片 ៥

Flow cytometry ត្រូវបានប្រើជាចម្បងសម្រាប់ការតម្រៀបកោសិកា។ ជាមួយនឹងភាពជឿនលឿននៃបច្ចេកវិជ្ជាកុំព្យូទ័រ ការអភិវឌ្ឍន៍នៃភាពស៊ាំ និងការបង្កើតបច្ចេកវិទ្យាអង្គបដិប្រាណ monoclonal កម្មវិធីរបស់វានៅក្នុងជីវវិទ្យា ឱសថ ឱសថស្ថាន និងវិស័យផ្សេងទៀតកំពុងរីករាលដាលកាន់តែខ្លាំងឡើង។ កម្មវិធីទាំងនេះរួមមាន ការវិភាគថាមវន្តកោសិកា កោសិកា apoptosis ការវាយបញ្ចូលកោសិកា ការវិនិច្ឆ័យដុំសាច់ ការវិភាគប្រសិទ្ធភាពថ្នាំ។ល។


ពេលវេលាផ្សាយ៖ ថ្ងៃទី ២១ ខែកញ្ញា ឆ្នាំ ២០២៣